全球觀察：高通量測序技術(shù)_高通量測序技術(shù)中的 ldquo 高通量 rdquo 是什么意思
來源：互聯(lián)網(wǎng)
時(shí)間：2023-05-29 01:51:05
1、高通量是相對于第一代測序的，第一代測序只能一次測1個樣品的1段序列，產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量相對來說很小，而高通量測序一次能夠產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量在幾十G上百G，可以一次測很多的樣本。
(相關(guān)資料圖)
2、在2000年的時(shí)候，3700、MegaBace等儀器上的測序也是高通量測序，是相對手工測序或者跑平板膠來說的。
3、不過到2005年以后，高通量測序就改指第二代測序（Next generation sequencing），454、Solexa(后改為Illumina）和SOLiD等第二代測序，比3730等第一代測序的通量提高了成千上萬倍，甚至上億倍，所以稱為高通量測序。
4、擴(kuò)展資料原理：測序方案建立在雙脫氧測序法(Sanger等，1977)的基礎(chǔ)上。
5、為了從每一克隆插入片段兩端成對地進(jìn)行測序，每一個質(zhì)粒模板DNA板應(yīng)配備兩個384孔循環(huán)測序反應(yīng)板。
6、測序反應(yīng)采用Big Dye Terminator chemistry version 3．1(AppliedBiosystems)和標(biāo)準(zhǔn)M13或常用正向引物和反向引物。
7、測序反應(yīng)通過BiomekFX(Beckman)移液操作工作站建立。
8、機(jī)械臂負(fù)責(zé)等分模板試樣，起與反應(yīng)液混合的作用，反應(yīng)液含有雙脫氧核苷酸、熒光標(biāo)記的核苷酸、TaqDNA聚合酶、序列引物和緩沖液。
9、模板和反應(yīng)板有條形碼，且在BiomekFX移液操作工作站上有條形碼讀取器跟蹤，確保模板和反應(yīng)液轉(zhuǎn)移中沒有錯誤。
10、30～40線性擴(kuò)增步驟連續(xù)循環(huán)在MJResearchTetrads或9700熱循環(huán)儀(Ap—pliedBiosystems)中進(jìn)行。
11、參考資料來源：百度百科-基因組高通量測序。
本文就為大家分享到這里，希望小伙伴們會喜歡。
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